哈蟆油基原物种DNA分子鉴定研究DNA molecular identification of Ranae oviductus original species
高晓晨;刘冬;白俊武;于江波;赵娜娜;宗颖;崔丽娜;张辉;孙佳明;
摘要(Abstract)：
目的建立一种简单、可行的蛤蟆油基原物种DNA分子鉴定方法,并为其鉴定提供有效的手段。方法以COI作为条形码序列,对蛤蟆油基原物种中国林蛙和黑龙江林蛙进行DNA提取,PCR扩增和双向测序,用CodonCode Aligner V 4.2.7校对拼接,并用MEGA6.0对其样品进行种内分析。结果实验样品可以获得蛤蟆油基原物种的序列,中国林蛙有34个碱基变异位点,种内平均K2P距离为0.042,种内最大K2P距离为0.058。黑龙江林蛙有3个碱基变异位点,种内平均K2P距离为0.003,种内最大K2P距离为0.005。结论运用COI条形码序列能够准确鉴定蛤蟆油基原物种,为其鉴定提供新方法。
关键词(KeyWords)： 哈蟆油;基原物种;DNA鉴定;碱基;中国林蛙;黑龙江林蛙
基金项目(Foundation): 吉林省中医药管理局中医药科技项目:蛤蟆油原动物及其混为品的COI序列分子鉴定(YJS-0228);; 国家中医药管理局行业专项:《中国药典》名贵珍稀动物药及混伪品鉴定技术规范应用研究(201407007)
作者(Author): 高晓晨;刘冬;白俊武;于江波;赵娜娜;宗颖;崔丽娜;张辉;孙佳明;
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DOI: 10.13463/j.cnki.jlzyy.2014.11.021
参考文献(References)：
- [1]国家药典委员会.中国药典:1部[M].北京:化学工业出版社,2010:147.
- [2]国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].上海:上海科学技术出版社,1999:421.
- [3]刘娟,刘爽,刘程诚.哈蟆油的真伪鉴别[J].黑龙江医药科学,2009,32(2):20-21.
- [4]陈丽娟.哈蟆油PCR鉴别方法的建立[D].长春:吉林农业大学,2012.
- [5]陈士林,宋经元,姚辉,等.药用植物DNA条形码鉴定策略及关键技术分析[J].中国天然药物,2009,7(5):322-327.
- [6]Hebert P D N,Cywinska A,Ball S L,et al.Biological identifications through DNA barcodes[J].Proc R Soc Lond B Biol Sci,2003,270:313-321.
- [7]陈士林,姚辉,宋经元,等.基于DNA barcoding(条形码)技术的中药材鉴定[J].世界科学技术——中医药现代化,2007,9(3):7-12.
- [8]Folmer O,Black M,Hoeh W,et al.DNA primers for amplification of mitochondrial cytochrome c oxidase subunit I from diverse metazoan invertebrates[J].Mol Mar Biol Biotechnol,1994(3):294-299.
- [9]罗盤,陈士林,陈科力,等.基于芸香科的植物通用DNA条形码研究[J].中国科学(生命科学),2010,40(4):342-351.
- [10]Hebert P D N,Cywinska A,Ball S L,et al.Biological identifications through DNA barcodes[J].Proc R Soc Lond B Biol Sci,2003(270):313-321.
- [11]陈士林,姚辉,韩建萍,等.中药材DNA条形码分子鉴定指导原则[J].中国中药杂志,2013,38(2):141-148.
- [12]陈士林,庞晓慧,姚辉,等.中药DNA条形码鉴定体系及研究方向[J].世界科学技术——中医药现代化,2011,13(5):747-754.