吉林中医药

2017, v.37(01) 62-66

[打印本页] [关闭]
本期目录(Current Issue) | 过刊浏览(Past Issue) | 高级检索(Advanced Search)

梅花鹿骨钙素的原核表达与活性研究
Prokaryotic expression and activity of sika deer osteocalcin

张楠楠;李宏灵;李帅军;张鹏飞;赵雨;曲毅;

摘要(Abstract):

目的利用基因工程技术表达纯化梅花鹿骨钙素重组蛋白(Bone gla protein,BGP)并初步研究其活性,为研究梅花鹿茸生长发育提供技术支撑。方法通过PCR技术获取BGP基因,构建p GEX-BGP-His表达载体,并转化至Rosseta(DE3)宿主菌中,IPTG诱导表达。经Ni Sephrose 6 Fast Flow分离纯化,SDS-PAGE鉴定纯化产物。MTT法分析BGP对鹿茸软骨细胞chon-sv40的生物活性。结果经双酶切、测序证实p GEX-BGP-His表达载体构建成功;成功诱导表达相对分子量33.5 KDa的重组蛋白;以37℃,0.1 mmol/L IPTG诱导5 h条件下重组蛋白表达量较高;蛋白纯化后纯度可达95%;重组蛋白对鹿茸软骨细胞chon-sv40具有明显促增殖作用。结论骨钙素与鹿茸软骨细胞chon-sv40的增殖密切相关,为后续BGP在骨代谢机制以及鹿茸有效成分的研究奠定基础,对鹿茸生长机制的研究具有重要意义。

关键词(KeyWords): 梅花鹿;骨钙素;原核表达;鹿茸软骨细胞

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 吉林省科技发展项目(20140622003JC);; 吉林省科技发展计划项目(20130101142JC)

作者(Author): 张楠楠;李宏灵;李帅军;张鹏飞;赵雨;曲毅;

Email:

DOI:

参考文献(References):

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享